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Mostrando entradas de enero, 2019
Investigación y recuento de enterobacterias lactosa-positivas: coliformes
CARACTERÍSTICAS DE LOS COLIFORMES Pertenecen a la familia Enterobacteriaceae. Está formado por varios géneros: Escherichia. Klebsiella. Citrobacter. Enterobacter. Se caracterizan por su capacidad para fermentar la lactosa con producción de ácido láctico y gas, en 24-48h a 30-37º. Se encuentran en el intestino de hombre y animales, pero también en suelos, semillas, vegetales... Se introducen al medio ambiente a través de las heces de humanos y animales. Indicadore de contaminación fecal en el control de calidad del agua destinada al consumo humano. Bacilos Gram -, no esporulados. Oxidasa negativos. Aerobios y anaerobios facultativos. PREPARACIÓN DE LAS DILUCIONES DECIMALES MATERIAL: - 3 tubos de 9ml de agua destilada estéril. - Pipetas y puntas. - Mechero Bunsen. - Agitador orbital. PASOS A SEGUIR: 1. Transferir 1ml de la muestra de agua a analizar a un tubo que contenga 9ml de agua (dilución1/10). 2. A partir de la mezc
Práctica 30. Observación de levaduras
MATERIAL A UTILIZAR: - Agua destilada. - Levadura. - Azúcar. - Microondas. - Vaso de precipitados. - Pipeta Pasteur. - Microscopio. - Porta y cubreobjetos. - Aceite de inmersión. PASOS A SEGUIR: 1. Coger agua destilada y echarla en un vaso de precipitados. Calentarla un poco en el microondas. 2. Partimos una porción muy pequeña de levadura y la echamos. A su vez, también echamos una cucharadita de azúcar. Lo movemos. 3. Con una pipeta Pasteur cogemos una gotita y la echamos en el porta. Ponemos el cubre y lo llevamos al microscopio. 4. Echamos aceite de inmersión y observamos con el objetivo de mayor aumento (100x). 5. Mientras que hacemos esto, dejamos que repose la mezcla del vaso de precipitados. 6. Una vez que ha reposado unos 5-10 minutos, repetimos el mismo proceso anterior y podemos ver como se van dividiendo las levaduras por gemación (en 2).
Práctica 29. Resiembra
MATERIAL A UTILIZAR: - Placa de Petri. - Asa de siembra. - Mechero de alcohol. - Mechero. - Muestra. - Papel de filtro. - Estufa. PASOS A SEGUIR: 1. Como el día anterior hicimos una siembra y no proliferó nada, utilizamos la placa de Petri y volvimos a sembrar. 2. Hice una siembra de 4 cuadrantes. 3. Se enciende el mechero de alcohol y esterilizamos el asa de siembra. Dejamos que se enfríe un poco para no matar los microorganismos. 4. Tomamos una muestra y sembramos en el 1º cuadrante. Sin esterilizar el asa de siembra, volvemos a sembrar en el 2º y así sucesivamente. 5. Esterilizamos el asa de siembra, cerramos la placa de Petri y la metemos en la estufa.
Práctica 28. Preparación de medios de cultivo y siembra
MATERIAL: - Balanza. - Papel de aluminio. - Cuchara. - Placa calefactora. - Cazo. - Termómetro. - Varilla agitadora. - Placas de Petri. - Matraz Erlenmeyer. - Muestras del yogur y del huevo anteriormente preparados. - Cinta adhesiva. - Nevera. - Estufa. - Agua destilada. - Embudo. - Probeta. - Papel de aluminio. - Micropipeta. - Pipeta Pasteur. - Medio de cultivo: Agar estándar, Agar MacConkey Sorbita, Bilis verde. PASOS A SEGUIR: 1. Cogemos 500ml de agua destilada en una probeta y lo echamos en el cazo. (Para los 3 medios de cultivo mismo paso). 2. Pesamos 11,75g de agar estándar en la balanza. Pesamos 20g de bilis verde. Pesamos 25,75g de MacConkey Sorbita. 3. Como había 3 placas calefactoras, fuimos haciéndolo por grupos. 4. Mezclamos lo que habíamos pesado con los 500ml de agua destilada y lo ponemos en el cazo para calentarlo en la placa calefactora. Tienen que llegar a los 100ºC. 5. Una vez co
Práctica 27. Manejo del stomacher y dilución decimal
MATERIAL: - Huevo y yogur. - Vaso de precipitados. - Cuchara. - Agua de peptona. - Balanza. - Mortero. - Stomacher. - Bolsa para el stomacher. - Micropipeta. - Pipeta Pasteur. - Gradilla. - Tubos de ensayo. PASOS A SEGUIR: 1. Cogemos 2 vasos de precipitados y en uno de ellos echamos el huevo y en el otro el yogur. 2. El del huevo lo desechamos porque lo que necesitamos es la cáscara. 3. Cogemos el mortero y lo ponemos en la balanza. Tenemos que pesar 10g de cáscara de huevo y 10g de yogur (usamos el vaso de precipitados). En ambos casos cogimos finalmente 10,1g de huevo y yogur. 4. Una vez pesado la cáscara de huevo, tenemos que triturarla hasta obtener un polvillo. 5. Mientras tanto cogemos 90ml de agua de peptona en una probeta. 6. Echamos los 90ml de agua de peptona en una bolsa para stomacher y los 10,1g de la cáscara de huevo triturada. 7. Lo metemos en el stomacher y lo programamos du
Práctica 26. Tinción de Gram
MATERIALES: - Portaobjetos. - Fregadero. - Paralelas. - Pinzas. - Asa de siembra. - Mechero Bunsen. - Agua destilada. - Microscopio. - Aceite de inmersión. - Reactivos: Violeta de Genciana, Fuchsina básica diluida, solución de lugol y alcohol de 96º. PASOS A SEGUIR: 1. Extensión de la muestra en el portaobjetos. 2. Con las pinzas cogemos el portaobjetos y desecamos con la ayuda de la llama del mechero. 3. Ponemos la muestra en las paralelas y le echamos Violeta de Genciana: 1 minuto. 4. Sin lavar, echamos solución de lugol, arrastrándolo primero y dejándolo actuar durante 1 minuto. 5. Una vez pasado el tiempo se lava con agua destilada. 6. Echamos alcohol durante aprox 30 segundos hasta lograr que la preparación salga exenta de colorante. 7. Lavar con agua destilada. 8. Echarle fuchsina durante 3 minutos. 9. Lavar con agua destilada. 10. Secar al aire libre o con la ayuda de la llama del mechero. 11.