Práctica 26. Tinción de Gram

MATERIALES:

- Portaobjetos.
- Fregadero.
- Paralelas.
- Pinzas.
- Asa de siembra.
- Mechero Bunsen.
- Agua destilada.
- Microscopio.
- Aceite de inmersión.
- Reactivos: Violeta de Genciana, Fuchsina básica diluida, solución de lugol y alcohol de 96º.

PASOS A SEGUIR:

1. Extensión de la muestra en el portaobjetos.

2. Con las pinzas cogemos el portaobjetos y desecamos con la ayuda de la llama del mechero.

3. Ponemos la muestra en las paralelas y le echamos Violeta de Genciana: 1 minuto.

4. Sin lavar, echamos solución de lugol, arrastrándolo primero y dejándolo actuar durante 1 minuto.

5. Una vez pasado el tiempo se lava con agua destilada.

6. Echamos alcohol durante aprox 30 segundos hasta lograr que la preparación salga exenta de colorante.

7. Lavar con agua destilada.

8. Echarle fuchsina durante 3 minutos.

9. Lavar con agua destilada.

10. Secar al aire libre o con la ayuda de la llama del mechero.

11. Ponemos la muestra en el microscopio y lo observamos. Enfocamos con los distintos objetivos, incluido el de 100x echando aceite de inmersión.

12. Las Gram + se ven de color azul-violeta y las Gram - de color rojo-rosado.